λYES（酵母—大腸桿菌穿梭載體）是構(gòu)建 cDNA 文庫的高效載體，這種載體是λ噬菌體基因組與一個在大腸桿菌和酵母中都能復制的質(zhì)粒巧妙結(jié)合而成，它兼有病毒和質(zhì)粒載體的優(yōu)點。cDNA 被插入載體的質(zhì)粒部分，然后它能在體外被包裝入病毒顆粒中，包裝起來的載體感染大腸桿菌的效率比質(zhì)粒本身要高得多。一旦進入了大腸桿菌，λYES中的質(zhì)粒序列能夠被誘導重組出λ基因組，并進行獨立復制，這就可以從質(zhì)粒中分離出來，以便進行進一步的遺傳操作。       為了最大限度地提高克隆效率，載體用只有一個切點的限制性內(nèi)切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）進行切割，然后在 dTTP 存在的情況下，同 DNA 聚合酶一起進行溫育。將一種具有平末端的雙鏈 cDNA 同一段含由兩段寡聚核苷酸組成的雙鏈寡聚核苷酸接頭連接起來，這兩段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它們的 5’端都是磷酸。然后將載體和 cDNA混合并連接在一起。采用這種方法用 2μg的7載體和 0.1μg 的 cDNA，構(gòu)建了一個有 4×10 個克隆的 cDNA 文庫。