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問(wèn)答題許多酶會(huì)受到重金屬離子，如Hg2+、Cu2+、Ag+等的不可逆抑制。這類(lèi)重金屬與酶中的活性巰基作用而使酶失活。E-SH＋Ag+→E-S-Ag+＋H＋Ag+與巰基的親和性如此之大，以至于A(yíng)g+可以用于-SH的定量滴定。欲使含有1.0mg/ml純酶的10ml酶液完全失活，需加入0.342mmol的AgNO3。計(jì)算此酶的最小分子量。為什么能用此法計(jì)算酶的最小分子量？

參考答案：

29，000；需要假定每一個(gè)酶分子只含有一個(gè)可滴定的巰基。

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1.問(wèn)答題紅細(xì)胞中的碳酸酐酶（Mr30000），具有很高的轉(zhuǎn)換數(shù)。它催化CO2的可逆水合反應(yīng)。H2O十CO2＝＝H2CO3此反應(yīng)對(duì)CO2從組織運(yùn)往肺部很重要。如果10mg的純碳酸酐酶，37℃ 下一分鐘內(nèi)以最大速度可催化0.3gCO2的水合反應(yīng)。碳酸酐酶的轉(zhuǎn)換數(shù)（Kcat）是多少？

參考答案：

2.0×107min-1或3.4×105s-1

2.問(wèn)答題根據(jù)米式方程求（a）Kcat為30s-1，Km為0.005M的酶，在底物濃度為多少時(shí)，酶促反應(yīng)的速度為1/4Vmax？（b）底物濃度為1/2Km，2Km和10Km時(shí)，酶促反應(yīng)的速率分別相當(dāng)于多少Vmax？

參考答案：

（a）1.7×10-3M（b）0.33；0.66；0.91

3.問(wèn)答題一個(gè)二肽酶對(duì)二肽Ala-Gly和二肽Leu-Gly的Km分別為2.8×10-4和3.5×10-2，哪一個(gè)二肽是酶的最適底物？該酶的兩個(gè)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的Ki值分別為5.7×10-2和2.6×10-4。哪一個(gè)是最強(qiáng)的抑制劑？

參考答案：

Ala-Gly是最適底物；Ki值最小的那個(gè)是最強(qiáng)的抑制劑。

4.問(wèn)答題1/v對(duì)1/[S]的雙倒數(shù)作圖得到的直線(xiàn)斜率為1.2×10-3min，在1/v軸上的截距為2.0×10-2nmol-1mlmin。計(jì)算Vmax和Km。

參考答案：

Vmax＝50nmolml-1min-1；Km＝6.0×10－2nmolml-1

5.問(wèn)答題從肝細(xì)胞中提取的一種蛋白水解酶的粗提液300ml含有150mg蛋白質(zhì)，總活力為360單位。經(jīng)過(guò)一系列純化步驟以后得到的4ml酶制品（含有0.08mg蛋白），總活力為288單位。整個(gè)純化過(guò)程的收率是多少？純化了多少倍？

參考答案：

80％；1500倍。